犬瘟热的诊断与防治(Canine distemper)

减小字体 增大字体 作者:佚名  来源:www.zhonghualunwen.com  发布时间:2009-02-06 09:48:54

 

犬瘟热的诊断与防治(Canine distemper)
辛国省
(莱阳农学院动物科技学院,山东莱阳265200)
 
    犬瘟热是由犬瘟热病毒引起的犬和肉食目中许多动物的一种高度接触传染性传染病,以早期表现双相热、急性鼻卡他以及随后的支气管炎、卡他性肺炎、严重的胃肠炎和神经症状为特征,少数病犬的奥和足垫可发生角化过度。
    犬瘟热最早发现于is世纪后叶。1,_ 5i}_}r年卡尔(Caere)发现其病原为病毒,所以本病也叫Carre氏病。此病分布于全世界。}19年我国分离获得本病毒,目前,我国各地亦时有发生。
    病原副钻病毒科麻疹病毒属的犬瘟热病毒(Canine distemper virus; CDV ),呈圆形或不整形,有时呈长丝状,大小150一300nm,病毒基因组为负链RNA,病毒主要蛋白质有核衣壳蛋白(N),磷蛋白(P)、大蛋白(L)、基质膜蛋白(M)、融合蛋白(F)、附着或血凝蛋白(H)。负链RNA被一个螺旋状衣壳包裹,主要由N组成,P和L也是核衣壳的成分。核衣壳呈螺旋形,直径为15一17nm,外被双层囊膜,其内部为M,膜上有长约1.3nm纤突病毒(H和F糖蛋白),只有一个血清型。病毒可在犬、雪貂和犊牛肾细胞、肺巨噬细胞、鸡胚成纤维细胞以及Vem细胞系等细胞中生长繁殖,但毒株之间有差异,后者是培养本病毒的首选细胞。但只有在传代与接毒同步进行时或同时加有胰酶的情况下,细胞才出现CPE,表现胞浆出现空泡、细胞逐渐圆缩、拉网,最后脱落。某些毒株可使肾细胞产生颗粒变性,形成空胞、巨细胞或合胞体等病变(CPE),并在胞浆内出现包涵体。本病毒连续通过雪貂可增强对雪貂的致病力,但对犬的毒力逐渐减弱。病毒通过鸡胚绒毛膜接种传代,毒力可减弱。病毒对紫外线和乙醚、抓仿等有机溶剂敏感。最适pH7.0,在pH4.5一9.0条件下均可存活。病毒在一70℃可存活数年,冻干可长期保存。对热和干燥敏感,50一60`C 30min灭活。3%福尔马林、5%石炭酸溶液以及3%苛性钠等对本病都具有良好的消毒作用。
    犬瘟热、麻疹和牛瘟病毒不仅在形态和超微结构上完全一致,而且具有某些共同的抗原性物质,表现为①牛瘟病毒可使机体对犬瘟热产生一定程度免疫力;②牛瘟抗血清中含有对麻疹病毒的中和抗体;③犬瘟热康复犬的血清中含有抗麻疹的抗体,同样,麻疹患者的血清中也含有对犬瘟热的电和抗体;④犬和雪貂接种麻疹病毒后对犬瘟热有一定的免疫力。它们对各自宿主和某些细胞培养物所致的病变也具有某些相似之处。目前国内外分离的毒株有日本弱毒株 CDV - J, On-demepoort弱毒株(CDV一ON), CDV一B1; CDV一B2, CDV一S, CDV一2, CDV一H及海豹瘟热病毒II型(PDV2)和I型(PDV1)等。病毒含血凝素,不含神经胺酶。依据毒株不同,并有较大差异,新分离毒株多数仅能与鸡和豚鼠红细胞产生不规律的凝集,并可被阳性血清抑制,适应鸡胚细胞的貂瘟病毒可凝集鸡红细胞。
    流行病学病犬是最重要的传染来源。病毒大量地存在于受染和患病动物的鼻、眼分泌物、
唾液中,也见于血液、脑脊液、淋巴结、肝、脾、脊髓、心包液及胸、腹水中,并且从尿中长期排毒,污染周围环境。因此,狗窝、狗的饲养场以及狗经常到的其它地方,都可能储存病毒。
    病犬和健犬直接接触,通过气溶胶微滴和污染的饲料、饮水,主要经呼吸道和消化道感染,也可经眼结膜和胎盘传染。
    犬最易感,凡是养犬的地方都有本病的发生,特别常见于城市或犬类比较集中的地方。不同年龄、性别和品种的犬都可感染,但2月龄以内的仔犬由于母源抗体的保护,80%不受感染;3一12月龄的幼犬易感性最高;2岁以上的犬发病率逐渐降低。犬疽热康复犬可获终身免疫力。
    本病多发生于寒冷季节(10月到第2年的2月),似有一定的周期性,每2-3年流行一次,但现在有些地方这种周期性不明显,常年发生。
    犬科的其它动物如狼、豺等和助科动物如貂、雪貂、白助、南美助鼠、臭助、黄鼠狼、稚、水獭等以及烷熊科的烷熊、密熊、白鼻熊、大小熊猫和猎狗等都对犬瘟热有自然易感性。此外海狮(娜威,1989)和瑞(美国,1991)也能自然感染发病。猴(日本,1990)也有易感性:从700只猴中的44只检出了抗体,并分离出了本病毒。本病在狐、水貂和艾虎等皮毛兽养殖场有时可发生流行,造成严重的经济损失。猫和猫属动物可隐性感染,雪貂对犬瘟热特别易感,自然发病的病死率常达100%,因此常用雪貂作为本病的实验动物。人、小鼠、豚鼠、鸡、仔猪和家兔等家畜对本病无易感性。
    发病机理感染后病毒主要从鼻咽和呼吸道散布到支气管淋巴结和扁桃体进行原发性增殖,引起病毒血症,病毒分布到全身淋巴器官、骨做和上皮结构的固有膜。约50%的犬于感染后迅速产生抗体,但不出现临诊症状。另一半的感染犬体内病毒继续增殖,广泛侵害多个系统的上皮细胞,而呈现特征性的症状。病毒通过脑膜巨噬细胞扩散到脑,并在3一4周时出现神经症状。有些感染犬仅有神经症状,这是由于病毒在抗体达到保护水平之前,已扩散到脑所致。老龄犬发生脑炎时要考虑到有感染本病的可能性。
    研究证明,在犬瘟热的临诊表现中,继发性细菌感染也起有很重要的作用。
    症状潜伏期一般3-5d。若野毒株来源于异种动物,由于需要一段适应时间,潜伏期可拉长到30一90d。初病犬精神萎顿,食欲不振或缺乏。眼、鼻流出浆猫性分泌物。以后变为脓性,有时混有血丝,发臭。发热39.5一41cC,约持续2d,以后下降到常温。此时病犬感觉良好,食欲恢复。2一3d后再次发热持续数周之久,即所谓的双相型发热(体温两次升高),此时,病情又趋恶化。鼻镜、眼睑干燥甚至龟裂;厌食,常有呕吐和发生肺炎。严重病例发生腹泻,粪呈水
样,恶臭,混有勃液和血液。病犬消瘦,脱水。体重不断下降,脚垫和鼻过度角质化。
    发热初期,少数幼犬下腹部、大腿内侧和外耳道发生水疙性脓疙性皮疹。康复时干枯消失。这可能是继发性细菌引起的,因为单纯性病毒感染不见这种皮疹。
    神经症状一般多在感染后3一4周,全身症状好转后几天至十几天才出现。经胎盘感染的幼犬可在4一7周龄时发生神经症状,且成窝发作。犬瘟热的神经症状视病毒侵害中枢神经系统的部位不同而有差异:或呈现癫痛、转圈,或共济失调、反射异常,或颈部强直、肌肉痉挛,但咬肌群反复节律性的颇动是本病常见的神经症状。病犬出现惊厥症状后,一般多取死亡转归。有些病例在其症状消失后,还遗留舞蹈病、麻痹或瘫痪等症状。
    仔犬于7日龄内感染时常出现心肌炎,双目失明,幼犬在永久齿长出之前感染本病,则有牙釉质严重损害,表现牙齿生长不规则。警犬、军犬发生本病后,常因嗅觉细胞萎缩而有嗅觉缺损。妊娠母犬感染本病可发生流产、死胎和仔犬成活率下降等症状。
    在发热的早期白细胞减少,但后期如细菌性继发感染未被控制,则出现明显的白细胞增多。病程一般.-2周或稍长些,并发卡他性肺炎和肠炎的病程可能较长;发生神经症状的病程最长。根据品种、年龄、有无并发和继发感染、护理和治疗条件的不同,病死率差异很大,波动于30%~so%之间。
    水貂的犬瘟热呈慢性或急性经过。慢性的病程为2一4周,主要表现为皮肤病变。脚爪肿胀,脚垫变硬,鼻、唇和脚爪部出现水疤状疹、化脓和结痴。.急性型的病程为3 - 10d、除出现上述皮肤病变外,还出现浆液性、猫液一脓性结膜炎和鼻炎,体温上升至40℃以上,并发生下痢和肺炎。最急性型者表现突然死亡。有神经症状,发出刺耳叫声、口吐白沫、抽搐而亡。
    豹、虎、狮等野生大型猫科动物发生犬瘟热时最初症状为食欲丧失,并发生胃肠和呼吸道症状。病理剖检变化与犬相同。
    病变本病是一种泛嗜性感染,病变分布广泛。有些病例皮肤出现水疤性脓疤性皮疹;有些病例鼻和脚底表皮角质层增生而呈角化病。上呼吸道、眼结膜呈卡他性或化脓性炎。肺呈现卡他性或化脓性支气管肺炎,支气管或肺泡中充满渗出液。在消化道中可见胃勃膜潮红。卡他性或出血性肠炎,大肠常有过量戮液,直肠猫膜皱袭出血。脾肿大。胸腺常明显缩小,且多呈胶冻状。肾上腺皮质变性。轻度间质性附事炎和皋丸炎。中枢和外周神经很少有肉眼变化。-
    组织学检查可在病犬的很多组织细胞中发现嗜酸性的核内和胞浆内包涵体、呈圆形或椭圆形,直径1一2tun。胞浆内包涵体主要见于泌尿道、膀脱、呼吸系统、胆管、大小肠戴膜上皮细胞内以及肾上腺健质、淋巴结、扁桃体和脾脏的某些细胞中。核内包涵体主要发现于膀胧细胞,一般难检查到。表现神经症状的病犬可见有脑血管袖套现象,非化脓性软脑膜炎以及白质出现空泡,很多潘金奇(Purkinje)细胞变性以及小脑神经胶质瘤病。
    诊断典型症状为眼、鼻流出浆液性分泌物,体温呈双相热型。病情恶化后,眼睑肿胀,呕吐,下痢,精神萎糜;神经型有神经症状,瘫痛样阵发性发作;肺炎型咳嗽声嘶,呼吸困难,有大量猫液性、脓性葬漏,听诊肺部有显著湿性罗音。瘫痪型后肢麻痹瘫痪,幼病犬下腹部、股内侧有丘疹、脓疤,有的鼻翼、足垫角化。,但本病常因存在混合感染(如与犬传染性肝炎等)和细菌性继发性感染而使临诊表现复杂化,所以只有将临诊调查资料与实验室检查结果结合考虑才能确诊。
    1.包洒体检查生前可抓扒鼻、舌、结膜、瞬膜和脸等,死后财刮膀脱、肾盂、胆囊和胆管等猫膜,做成涂片,干燥,甲醇固定,苏木紫和伊红染色后,镜检。一包涵体红色,见于胞浆内,一个细胞内可能有1一10个,平均2一3个,圆形或椭圆形,边缘清晰。发现包涵体可作为诊断依据。有时仅根据包涵体的存在,可能导致假阳性诊断,最好还要进行病毒分离鉴定或血清学检查。
    2.病毒分离发病早期采淋巴组织;急性病例取胸腺、脾、肺、r肝、淋巴结;呈脑炎症状者采小脑等病料,制成10%乳剂,加适量双抗或经微孔撼膜过滤后,腹腔接种1一2周龄或断乳15d的易感幼犬5n1,症状明显,常于发病后2周死亡;或脑内接种易感雪貂0.5一LOm1,. 8一12d鼻流水样分泌物,不久变为脓性,眼睑水肿、猫连,须发红,嘴边出现水疤和脓疮,脚肿,两趾发红,病貂蜷缩,拒食,于发病5一6d后死亡;也可将上述病料乳剂经无菌处理后接种于犬肾原代细胞、鸡胚成纤维细胞或仔犬肺胞巨噬细胞(后者细胞堵养物在1一2d内出现胞浆内包涵体,在两天内形成大细胞),进行分离病毒。剖检时也可直接培养病犬的肺胞巨曦细胞以分离病毒。这是一种容易成功和快速分离病毒的方法。病毒于细胞上培养后,可用免疫荧光抗体技术或琼脂扩散试验进行本病毒鉴定。
    应用鸡胚、乳鼠或仓鼠等从自然病例分离病毒是不适合的,因为只有已经适应的毒株,才能在这些宿主生长繁殖。
    3.血清学检查中和试验、荧光抗体法、琼脂扩散试验和醉标抗体法等都可选用来诊断本病。
    血清中和试验:将被检血清稀释后加人病毒,25PC作用2h,与制备好的犬肾或绿猴肾细胞悬液混合接种于微量培养板,5% Coz条件下35一36℃培养3d染色检查CPE.荧光抗体检查:急性病犬的淋巴细胞、结膜、阴道细胞、脑脊健液涂片做荧光抗体染色,其阳性胞浆显示弥散性荧光。亚急性或慢性病犬由于产生中和抗体,通常难以查出阳性细胞,该法比检查包涵体更有意义。‘
    4.分予诊断技术国内外均已建立了RT - PCR和核酸探针技术用于本病诊断。该法简便快速、灵敏特异,有广阔应用前景。
    在本病的诊断中要注意与犬传染性肝炎、犬细小病毒性肠炎、钩端螺旋体病、狂犬病及犬副伤寒作区别诊断。
    犬传染性肝炎缺乏呼吸道症状,有剧烈腹痛特别是剑突压痛。血液不易凝结,如有出血,往往出血不止。剖检时有特征性的肝和胆囊病变及体腔的血液渗出液。而犬瘟热则无此变化。犬传染性肝炎组织学检查为核内包汤体,而犬瘟热则是胞浆内和核内包涵体,且以胞浆内包汤体为主。
    犬细小病毒病肠炎型典型症状为出血性腹泻;病犬发病急,病死率高,眼、鼻缺乏卡他性炎症。发病初期(3一9d),其粪便上清液对猪的红细胞具有较高的凝集作用。
    钩端螺旋体病不发生呼吸道炎症和结膜炎,但有明显黄疽。病原为钩端螺旋体。
    狂犬病有喉头和咬肌麻痹症状及攻击性,而犬瘟热则没有。
    副伤寒生前无呼吸道症状和皮疹,剖检见脾显著肿大,病原为沙门氏杆菌。而犬瘟热病例的脾一般正常或稍肿,病原为病毒。
    防创发现疫情应立即隔离病犬,深埋或焚毁病死犬尸,彻底消毒(用3%福尔马林、3%
氢载化钠或5%石炭酸溶液等)污染环境、场地、犬舍以及用具等。对未出现症状的同群犬和其他受威胁的易感犬进行紧急接种。病犬及早用抗血清(每千克体重皮下或肌肉注射2 - 3nd)、球蛋白、抗菌药物、皮质激素类药物、免疫增强剂、维生素和对症支持疗法(如愉液、脱敏、退热、镇静、止痛、收敛及循环兴奋剂等)进行治疗,配合良好的护理,对早期病犬可获一定疗效。当出现明显症状时,则多预后不良。平时严格兽医卫生防疫措施,坚持进行免疫注射,犬瘟热是可以预防的。我国目前用于预防本病的疫苗有单价苗(鸡胚细胞弱毒冻干苗)、三联苗(犬瘟热、犬传染性肝炎和犬细小病毒病)、五联苗(犬瘟热、传染性肝炎、犬细小病毒病、犬副流感和狂犬病)以及麻疹苗等多种疫苗,按厂家说明书使用。
    幼犬的免疫效果与其母源抗体(简称母抗)水平关系很大。幼犬母抗的半衰期为8.5d。多数幼犬母抗在12周龄减弱,15周龄全消失。当血液中母抗(中和抗体)下降到1:20以下时较为易感,1:100以年则不易感。因此血液中抗体滴度1:100以下是免疫接种的指示滴度。一般母犬抗体滴度不明的幼犬初免为9周龄,二免15周龄,以后每年加强免疫一次。母犬配种前免疫接种。孕犬一般不进行免疫接种。据研究麻疹弱毒疫苗对8周龄以上的幼犬免疫效力好,注射后8h即产生保护力。它虽与犬瘟热病毒具有密切的抗原关系,但它既不被犬瘟热抗体中和,也不为宿主细胞排出,保持免疫保护力达8个月之久。所以在疫区对刚断乳的易感犬,先注射2-3人份的人用麻疹弱毒冻干苗,半个月后再以2-3周的间隔注射2-3次犬瘟热弱毒疫苗,可获较好的免疫效果。
    近年来,成犬接种犬瘟热弱毒苗时偶有发生接种性脑炎、母犬分娩后3d注苗时易使其仔犬发生脑炎,要引为鉴诫。国内外为更好地提高免疫效果,开展对该病基因工程重组活疫苗和亚单位苗的研究,并证明其有免疫保护作用,有望用于临床实践。犬瘟热弱毒苗对雪貂和水貂也可产生良好免疫效果,但也多受母源抗体干扰,有母源抗体的仔水貂,在断奶后8-10d可接种疫苗,有母抗的仔雪貂在6周龄内不应接种疫苗。狐狸应用犬瘟热鸡胚弱毒苗后,能获得持续2年的免疫力,其免疫效果与犬、貂相同,用雪貂弱毒苗可产生一些临床症状。Miller应用细胞培养弱毒苗给院熊和长吻院熊、密熊免疫接种,取得成功,有人认为雪貂和小熊猫接种犬疽热弱毒苗,病毒可产生变异,故应慎用,Fisher推荐用犬疽热灭活苗免疫臭助。我国饲养的乌苏里貂,使用犬瘟热弱毒苗后,未见不良反应。美国制造的水貂犬盆热气雾免疫疫苗,对一窝仔兽气雾一次即可完成免疫。

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