HPLC测定不同生长年限蒙古黄芪中黄芪甲苷含量

减小字体 增大字体 作者:佚名  来源:本站整理  发布时间:2017-10-07 09:42:19

 1 材料与方法 
  1.1 材料 
  1.1.1 研究对象。1、2、3、4、5和6年生蒙古黄芪于2015年10月、2016年10月采自山西省大同市浑源县,均为人工驯化后栽培品种,经西安医学高等专科学校中草药鉴定专家许文友教授鉴定为蒙古黄芪[Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge. Var. MongholicusHsiaoBge.]的干燥根茎,去除须根后清洗干净并切片、烘干。 
  1.1.2 主要试剂黄芪甲苷对照品(批号:0781-200109),由西北农林科技大学中草药指纹图谱实验室提供,专供含量测定使用;经HPLC检测纯度≥98%;色谱乙腈,由上海化学试剂有限责任公司生产,批号为20060530;其他试剂均为由西安医专药学实验室提供的国产分析纯;水为购自人人乐超市的娃哈哈牌饮用纯净水。 
  1.1.3 主要仪器安捷伦Agilent1260LC高效液相色谱仪,由美国Agilent公司生产,同机配置有真空在线脱气机、六通阀进样器、柱温箱、Alltech ELSD 3300蒸发光散射检测器、Infinity四元梯度泵;Agilentchemstation化学工作站;KQ-250DE型超声波清洗器,由江苏昆山市超声仪器公司生产;RE-52AA型旋转蒸发仪,由上海亚荣仪器有限公司生产;SHZ-Ⅲ循环水式真空泵,由巩义市予华仪器有限责任公司生产;MettlerAE240电子天平,由梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司生产;FZ-102型微型植物样品粉碎机,由北京市永光明医疗仪器有限公司生产;电热恒温水浴锅,由北京市永光明医疗仪器有限公司生产。 
  1.2 方法 
  1.2.1 對照品溶液的制备精密称定干燥至恒重的黄芪甲苷对照品3.000mg,加甲醇10.00ml,制成浓度为300μg/ml的溶液,即得对照品溶液。 
  1.2.2 供试品溶液的制备将蒙古黄芪样品风干后粉碎,过60目筛,精密称取蒙古黄芪粉末4g,置于索氏提取器中,加入甲醇40ml,过夜,常温下加入适量的甲醇加热回流提取一次,提取液回收甲醇浓缩至干燥残渣,残渣用水(微热)溶解,然后水饱和的正丁醇振荡重复提取3次,并将正丁醇液合并,然后用20mL氨试液洗涤,重复2次,弃掉氨液,正丁醇液蒸干,再次用甲醇溶解并定容于5mL的容量瓶中,摇匀后用0.45μm微孔滤膜过滤,取续滤液,即得供试品溶液。 

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